mention the uniqueness of DNA polymerase used in PCR?
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reaction in which multiple copies of specific DNA (gene of interest) sequence are made (amplification) in vitro. The technique was developed by Kary Mullis in 1985 who received Nobel Prize for chemistry in 1993.
(a) PCR technique requires
A DNA template which is a double stranded DNA that needs to be amplified.
Primers are small chemically made oligonucleotides of about 10-18 nucleotides that are complementary to a region of template DNA.
Enzymes used are DNA Taq polymerase (from a bacterium, Thermus aquaticus).
(b) Steps in PCR
Denaturation of double stranded DNA is carried out by applying high temperature of 95°C for 15 seconds. Each separated single strand acts as a template for DNA synthesis.
Annealing is carried out by two sets of primers, which are added in the reaction. They anneal to the 3′ end of each separated strand. Primers act as initiator of replication.
Extension is done by DNA polymerase by adding nucleotides complementary to the template in the reaction.
जिसमें विशिष्ट डीएनए (ब्याज की जीन) अनुक्रम की कई प्रतियां इन विट्रो में बनाई गई हैं (प्रवर्धन)। इस तकनीक को 1985 में Kary Mullis द्वारा विकसित किया गया था, जिन्हें 1993 में रसायन विज्ञान के लिए नोबेल पुरस्कार मिला था।
(ए) पीसीआर तकनीक की आवश्यकता है
एक डीएनए टेम्प्लेट जो एक दोहरे फंसे डीएनए है जिसे प्रवर्धित करने की आवश्यकता है।
प्राइमर लगभग 10-18 न्यूक्लियोटाइड के छोटे रासायनिक रूप से बने ऑलिगोन्यूक्लियोटाइड होते हैं जो टेम्पलेट डीएनए के एक क्षेत्र के पूरक हैं।
उपयोग किए जाने वाले एंजाइम डीएनए टैक पोलीमरेज़ (एक जीवाणु, थर्मस जलीय से) हैं।
(b) पीसीआर में कदम
15 सेकंड के लिए 95 डिग्री सेल्सियस के उच्च तापमान को लागू करने से दोहरे फंसे डीएनए का विकृतीकरण किया जाता है। प्रत्येक अलग एकल स्ट्रैंड डीएनए संश्लेषण के लिए एक टेम्पलेट के रूप में कार्य करता है।
एनीलिंग को प्राइमरों के दो सेटों द्वारा किया जाता है, जिन्हें प्रतिक्रिया में जोड़ा जाता है। वे प्रत्येक अलग-अलग स्ट्रैंड के 3 3 के अंत की घोषणा करते हैं। प्राइमर प्रतिकृति के सर्जक के रूप में कार्य करते हैं।
प्रतिक्रिया में टेम्पलेट में न्यूक्लियोटाइड के पूरक जोड़कर डीएनए पोलीमरेज़ द्वारा विस्तार किया जाता है।
(a) PCR technique requires
A DNA template which is a double stranded DNA that needs to be amplified.
Primers are small chemically made oligonucleotides of about 10-18 nucleotides that are complementary to a region of template DNA.
Enzymes used are DNA Taq polymerase (from a bacterium, Thermus aquaticus).
(b) Steps in PCR
Denaturation of double stranded DNA is carried out by applying high temperature of 95°C for 15 seconds. Each separated single strand acts as a template for DNA synthesis.
Annealing is carried out by two sets of primers, which are added in the reaction. They anneal to the 3′ end of each separated strand. Primers act as initiator of replication.
Extension is done by DNA polymerase by adding nucleotides complementary to the template in the reaction.
जिसमें विशिष्ट डीएनए (ब्याज की जीन) अनुक्रम की कई प्रतियां इन विट्रो में बनाई गई हैं (प्रवर्धन)। इस तकनीक को 1985 में Kary Mullis द्वारा विकसित किया गया था, जिन्हें 1993 में रसायन विज्ञान के लिए नोबेल पुरस्कार मिला था।
(ए) पीसीआर तकनीक की आवश्यकता है
एक डीएनए टेम्प्लेट जो एक दोहरे फंसे डीएनए है जिसे प्रवर्धित करने की आवश्यकता है।
प्राइमर लगभग 10-18 न्यूक्लियोटाइड के छोटे रासायनिक रूप से बने ऑलिगोन्यूक्लियोटाइड होते हैं जो टेम्पलेट डीएनए के एक क्षेत्र के पूरक हैं।
उपयोग किए जाने वाले एंजाइम डीएनए टैक पोलीमरेज़ (एक जीवाणु, थर्मस जलीय से) हैं।
(b) पीसीआर में कदम
15 सेकंड के लिए 95 डिग्री सेल्सियस के उच्च तापमान को लागू करने से दोहरे फंसे डीएनए का विकृतीकरण किया जाता है। प्रत्येक अलग एकल स्ट्रैंड डीएनए संश्लेषण के लिए एक टेम्पलेट के रूप में कार्य करता है।
एनीलिंग को प्राइमरों के दो सेटों द्वारा किया जाता है, जिन्हें प्रतिक्रिया में जोड़ा जाता है। वे प्रत्येक अलग-अलग स्ट्रैंड के 3 3 के अंत की घोषणा करते हैं। प्राइमर प्रतिकृति के सर्जक के रूप में कार्य करते हैं।
प्रतिक्रिया में टेम्पलेट में न्यूक्लियोटाइड के पूरक जोड़कर डीएनए पोलीमरेज़ द्वारा विस्तार किया जाता है।
pravee73:
1 word answer i need
Dna synthesis
ke liye
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